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热启动PCR的优势

栏目:公司新闻 发布时间:2022-09-21
聚合酶链式反应(PCR)由1983年美国Mullis首先提出设想,到至今,PCR已发展到第三代技术。

聚合酶链式反应(PCR)由1983年美国Mullis首先提出设想,到至今,PCR已发展到第三代技术。
  
PCR扩增流程图:

  在传统的PCR反应中,利用冰上配制反应体系,来尽量避免Taq酶常温有部分活性的问题,来解决引物错配和二聚体引起的非特异性扩增等现象,但是无法完全解决非特异性产物,造成实验结果的不准确性。热启动型PCR能够很好的解决上述问题,是最常用的提高PCR特异性的方法。
  热启动PCR(hot start PCR)是指DNA聚合酶只有在样品温度至少超过70℃时才发挥作用的PCR。通过这种方式控制PCR反应的必须组分DNA聚合酶,直到反应混合物被加热到可以阻止非特异引导和引物聚合的温度后,再启动PCR达到有效扩增特异性PCR产物的目的。
  
抗体法修饰热启动酶原理图:
热启动PCR的应用方面较为广泛,不仅有效防止非特异性PCR产物,而且在较难扩增的PCR反应如单拷贝基因的扩增、多重PCR和超长片段的扩增等应用尤为突出,大大改观了传统PCR技术的局限性。在病原微生物检测、遗传病诊断和法医鉴定等各个领域等实际应用中颇为广泛。在应对全球爆发的新冠疫情方面,热启动酶亦贡献颇多。目前市面上应用于SARS-Cov-2的一步法RT-qPCR检测试剂的核心酶基本都是抗体法热启动酶。
 
 NOW!自2022年9月起,东盛生物PCR预混液系列产品全新升级至热启动版本,产品性能显著提升!欢迎试用体验!(常规PCR Mix, #P2011/P2012/P2013/P2014/P2015保持普通版本)
  东盛一管式PCR预混液不仅使用方便,而且性能优异,通过抗体修饰的热启动改造进一步提升了产品的特异性和扩增效率等性能。


部分产品升级对比图

高保真PCR--Pfu Mix——在保证保真度的基础上显著提高PCR扩增效率:
高效率PCR--Plus Mix——在原有高扩增效率的基础上进一步提高特异性:
染料法qPCR Mix ——抗体修饰升级,曲线更完美:
  东盛生物专注研发与生产PCR相关产品17余年,客户遍布海内外40多个国家和地区,产品涵盖DNA聚合酶、PCR预混液、荧光定量qPCR预混液、一步法RT-qPCR预混液等产品,不仅可用于生命科学基础研究,而且可作为核心工业原料赋予各类分子诊断产品精准的检测能力。

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