13 2025.03
怎样在线做PCR引物设计
要先对PCR目的序列的长度有个大致估计:
第一步:找到Primer3的站点。你不用记住这个站点,但是要记住“Primer3”这个词,然后打开GOOGLE首页,输入Primer3,跳出来的第一个项目就是了“Prim [...]
13 2025.03
DNA电泳常见问题分析之一
1 请问配制聚丙烯酰胺凝胶电泳胶时,促凝的是TEMED还是过硫酸铵?胶聚时间很长如何解决?
过硫酸铵提供驱动丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所需的自由基,而TEMED通过催化过硫酸铵形成自由基而 [...]
13 2025.03
PCR常见问题分析之二/克隆
1 克隆PCR产物的最优条件是什么?
最佳插入片段:载体比需实验确定。1:1(插入片段:载体)常为最佳比,摩尔数比1:8或8:1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Wei [...]
13 2025.03
核酸纯化常见问题分析之二/质粒提取
1、从柱离心式产品的流行看经典方法的缺点 (或者操作重点)
柱式方法的风行是无法否定的现实。下面通过柱式方法与经典方法的比较,看一看如何注意经典方法的操作重点。
裂解,二者几乎没 [...]
13 2025.03
如果不慎发生污染情况,该怎么办?
如果不慎发生污染情况,应从下面几条出发,逐一分析,排除污染。
(1)设立阴阳性对照:有利于监测反应体系各成分的污染情况。选择阳性对照时,应选择扩增弱,且重复性好的样品,因强阳性 [...]
13 2025.03
PCR常见问题分析之一
1 PCR产物的电泳检测时间
一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。
2 假阴性,不出现扩增条带,应该怎么办?
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制 [...]
13 2025.03
核酸纯化前应了解的常见问题
1、 在提核酸前,对实验样品你应该知道什么?
样品的核酸含量、酶含量、特殊杂质含量。
绝大情况下,使用新鲜样品可以获得最好的结果,但对一些杂质含量高的样品,-20℃保存一天后抽提,可 [...]
13 2025.03
PCR操作时应注意的事项
PCR检测微量感染因子时,容易因为污染的而导致各种问题,因此,进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。
(1)划分操作区 [...]
13 2025.03
PCR Mix的扩增产物能直接测序吗?
可以。测序公司在进行PCR产物直接测序前,会对PCR产物进行纯化,去除体系中影响测序的组分,所以PCR Mix中的溴酚蓝并不会影响后续测序反应。
东盛生物提供含溴酚蓝和不含溴酚蓝两种体系, [...]
13 2025.03
实验室自己可以配制PCR Mix吗?
可以。但实验室自配的PCR Mix稳定性差,无法长期保存,且易出现灵敏度低、扩增长度短、重复性差等问题,而东盛的PCR Mix添加了特殊的稳定剂,可以确保在室温2周或-20℃2年的条件下,扩增效 [...]
13 2025.03
怎样使用凝胶成像系统的定量分析
快捷指南Volumes Quick Guide,此功能能对任意所选区域进行定量分析,此分析可以报告2个结果:相对浓度和绝对浓度(如有浓度标准样品)
1. 选择成像系统或打开已保存的文件(软件可以控制 [...]
13 2025.03
Mix Kit系列相比Mix系列有什么不同?
在PCR实验中,选择合适的试剂对于实验的成功至关重要。东盛公司推出了两种不同的PCR试剂产品:2×PCR Mix和PCR Mix Kit。这两种产品在组成、使用方法和特点上有所不同,适用于不同的实验 [...]