21 2025.04
KASP引物设计开发
KASP（Kompetitive Allele-Specific PCR，竞争性等位基因特异性PCR）是一种基于PCR的基因分型技术，主要用于检测单核苷酸多态性（SNP）和其他特定基因变异。广泛应用于农业育种、医学研究 [...]
13 2025.03
怎样在线做PCR引物设计
要先对PCR目的序列的长度有个大致估计：
第一步：找到Primer3的站点。你不用记住这个站点，但是要记住“Primer3”这个词，然后打开GOOGLE首页，输入Primer3，跳出来的第一个项目就是了“Prim [...]
13 2025.03
DNA电泳常见问题分析之一
1 请问配制聚丙烯酰胺凝胶电泳胶时，促凝的是TEMED还是过硫酸铵？胶聚时间很长如何解决？
过硫酸铵提供驱动丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所需的自由基，而TEMED通过催化过硫酸铵形成自由基而 [...]
13 2025.03
PCR常见问题分析之二/克隆
1 克隆PCR产物的最优条件是什么？
最佳插入片段：载体比需实验确定。1：1（插入片段：载体）常为最佳比，摩尔数比1：8或8：1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Wei [...]
13 2025.03
核酸纯化常见问题分析之二/质粒提取
1、从柱离心式产品的流行看经典方法的缺点 （或者操作重点）
柱式方法的风行是无法否定的现实。下面通过柱式方法与经典方法的比较，看一看如何注意经典方法的操作重点。
裂解，二者几乎没 [...]
13 2025.03
如果不慎发生污染情况，该怎么办？
如果不慎发生污染情况，应从下面几条出发，逐一分析，排除污染。
（1）设立阴阳性对照：有利于监测反应体系各成分的污染情况。选择阳性对照时，应选择扩增弱，且重复性好的样品，因强阳性 [...]
13 2025.03
PCR常见问题分析之一
1 PCR产物的电泳检测时间
一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。
2 假阴性，不出现扩增条带，应该怎么办？
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制 [...]
13 2025.03
核酸纯化前应了解的常见问题
1、 在提核酸前，对实验样品你应该知道什么？
样品的核酸含量、酶含量、特殊杂质含量。
绝大情况下，使用新鲜样品可以获得最好的结果，但对一些杂质含量高的样品，-20℃保存一天后抽提，可 [...]
13 2025.03
PCR操作时应注意的事项
PCR检测微量感染因子时，容易因为污染的而导致各种问题，因此，进行PCR操作时，操作人员应该严格遵守一些操作规程，最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。
（1）划分操作区 [...]
13 2025.03
PCR Mix的扩增产物能直接测序吗？
可以。测序公司在进行PCR产物直接测序前，会对PCR产物进行纯化，去除体系中影响测序的组分，所以PCR Mix中的溴酚蓝并不会影响后续测序反应。
东盛生物提供含溴酚蓝和不含溴酚蓝两种体系， [...]
13 2025.03
实验室自己可以配制PCR Mix吗？
可以。但实验室自配的PCR Mix稳定性差，无法长期保存，且易出现灵敏度低、扩增长度短、重复性差等问题，而东盛的PCR Mix添加了特殊的稳定剂，可以确保在室温2周或-20℃2年的条件下，扩增效 [...]
13 2025.03
怎样使用凝胶成像系统的定量分析
快捷指南Volumes Quick Guide，此功能能对任意所选区域进行定量分析,此分析可以报告2个结果：相对浓度和绝对浓度（如有浓度标准样品）
1． 选择成像系统或打开已保存的文件(软件可以控制 [...]