48小时工作台稳定性，实现高通量处理和操作便利
东盛PCR Mix预混液经过精心设计，可在预组装反应中保持长达48小时的高水平性能。这种混合物的稳定性为高通量液体处理系统的用户提供了保证，即第一块板上的结果将与最后一块板上的结果相似。
对于那些对通量需求不太高的人来说，这种预混液的增强稳定性为您的工作流程提供了整体上的便利，因为您不再局限于在冰盒上组装后立即运行孔板，用户能够自信和灵活地在众多工作流程场景中使用。
东盛生物能实现工作台稳定的PCR Master Mix
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应用场景 |
产品名称 |
货号 |
规格* |
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染料法qPCR |
SYBR Green qPCR Mix |
P2091/P2092 |
1 ml/1 ml×5 |
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探针法多重qPCR |
Multiplex Probe qPCR Mix Plus U |
P2701/P2702 |
1 ml/1 ml×5 |
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数字PCR |
Super Probe ddPCR Mix |
P2901/P2902 |
1 ml/1 ml×5 |
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高灵敏NGS PCR |
DSPath NGS Multiplex PCR Master Mix II |
K031-A/K031-B |
80 rnxs/400 rnxs |
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NGS PCR富集 |
NGS Multiplex PCR Master Mix II |
NM2001/NM2002 |
40 rnxs/400 rnxs |
SYBR Green qPCR Mix
工作台稳定性测试
以生菜RNA为模板逆转录生成cDNA，并稀释至10ng/µl, 1ng/µl, 0.1ng/µl, 0.01ng/µl，4个梯度。通过SYBR Green qPCR Mix进行EIF2A基因检测。表1展示了各个浓度梯度下0 hr和48 hr的Ct值，以及Ct值的差值。可以看出，预装配体系室温放置48小时后SYBR Green qPCR Mix依然具有优秀的扩增表现。
表1
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cDNA浓度 (ng/µl) |
Ct Value 0 hr 48hr |
△Ct48hr-0hr |
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10 |
25.26 |
25.01 |
-0.25 |
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1 |
28.12 |
28.37 |
0.25 |
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0.1 |
30.77 |
30.81 |
0.04 |
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0.01 |
32.01 |
31.96 |
-0.05 |
Multiplex Probe qPCR Mix Plus U
工作台稳定性测试
以人基因组DNA（0.1ng/µl）为模板，通过Multiplex Probe qPCR Mix Plus U进行基因检测。图1、图2分别是在反应体系配制完成后（0 hr）和室温（25℃）放置48小时后（48 hr）进行检测的扩增曲线；同时与厂家T同类产品进行对比测试，图3、图4分别是厂家T装配完成0 hr和48 hr的扩增曲线。表2展示Multiplex Probe qPCR Mix Plus U和厂家T在0 hr和48 hr的Ct值。可以看出，预装配体系室温放置48小时后Multiplex Probe qPCR Mix Plus U依然具有优秀的扩增表现。
图1: P2701-0hr
图2: P2701-48hr
图3: supplier T-0hr
图4: supplier T-48hr
表2
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Target |
Ct Value-P2701 0 hr 48hr |
Ct Value-supplier T 0 hr 48hr |
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CY5 |
29.18 |
29.26 |
27.01 |
27.05 |
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FAM |
33.05 |
33.09 |
33.15 |
36.28 |
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ROX |
26.24 |
26.21 |
26.46 |
26.45 |
DSPath NGS Multiplex PCR Master Mix II
工作台稳定性测试
DSPath NGS Multiplex PCR Master Mix II不仅能满足tNGS微量测序的需求，也能表现出优良的工作台稳定性，满足高通量测序大量样品同时上机的需求，最大程度上减少加样顺序造成的差异。图5-8分别展示了反应体系于室温下放置0hr和48hr后的各项指标，可以看出表现基本一致，说明DSPath NGS Multiplex PCR Master Mix II可以满足48小时工作台稳定性。
图5: 扩增产量 图6: 引物二聚体比例
图7: 病原体物种检出率 图8: 目标reads检出率