使用说明书
【产品名称】
Fast DNA Library Plus Prep Kit for MGI
【货号/规格】
KM004-A(24 rxns);KM004-B(96 rxns);试用装(6 rxns)
【产品简述】
本试剂盒针对 MGI 高通量测序平台,提供了一管式便捷、通用的 DNA 文库构建方案,将片段化、末端补平和末端加 A 结合到一个步骤,大大缩短了建库的时间、减少了繁琐步骤造成的误差,片段化和末端修复后的产物可直接进行接头连接,不需额外纯化,后续操作和#KM001 Fast DNA Library Prep Kit for MGI操作相同。完整的文库定量可将文库稀释至合适浓度,用双链 DNA 荧光染料方法(如Thermo Qubit Flex Fluorometer)或 qPCR 绝对定量方法。
【样本类型】
表 1 常用DNA推荐投入量
应用 | 样本类型 | 推荐投入量 |
全基因组测序 | 高质量复杂基因组 | 50ng-1μg |
全外显子靶向捕获测序 | 高质量复杂基因组 | 10ng-1μg |
全基因组靶向捕获测序 | FFPE DNA | ≥50ng |
全基因组测序 | 微生物基因组 | 1ng-1μg |
推荐使用 TE 或超纯水溶解 DNA 样品,如样品中含有 EDTA,则需磁珠纯化或加入一定体积的 Neutralization Buffer 中和。
【储存条件及有效期】
所有试剂均应保存于-20℃,Ligation Buffer 在低温下会有晶体析出,属正常现象, 应平衡至室温后使用,产品有效期为 12 个月。
【组成成分】
组分 | 24 rxns | 96 rxns |
FEP Buffer | 120 μl | 480 μl |
FEP Enzyme Mix | 240 μl | 2×480 μl |
Fast DNA Ligase | 120 μl | 2×240 μl |
Fast Ligation Buffer | 600 μl | 4×600 μl |
2× HIFI Library PCR Master Mix | 600 μl | 4×600 μl |
Primer Mix for MGI * | 120 μl | 480 μl |
Neutralization Buffer | 120 μl | 480 μl |
*FEP Buffer 为片段化、末端修复的反应 buffer,FEP Enzyme Mix 为片段化、末端修复相关酶混合物。
*若有多个样本,则推荐使用#KM002 和#KM003 接头引物组合,本试剂盒提供一套引物,引物序列如下:
5’-TGTGAGCCAAGGAGTTG-3’
5’-GAACGACATGGCTACGA-3’
备注:分选磁珠推荐使用#NC1011 GDSPure DNA Selection Magbeads 或 AMPure XP beads。