【产品名称】
Fast DNA Library Plus Prep Kit
【货号/规格】
K004-A(24 次);K004-B(96 次);试用装(6 次)
【产品简述】
本试剂盒针对 Illumina 高通量测序平台,提供了一管式便捷、通用的 DNA 文库构建方案,将片段化、末端补平和末端加 A 结合到一个步骤,大大缩短了建库的时间、减少了繁琐步骤造成的误差,片段化和末端修复后的产物可直接进行接头连接,不需额外纯化,后续操作和#K001 Fast DNA Library Prep Kit操作相同。完整的文库定量可将文库稀释至合适浓度,用双链 DNA 荧光染料方法(如Thermo Qubit Flex Fluorometer)或 qPCR 绝对定量方法。
【样本类型】
表 1 常用DNA推荐投入量
应用 |
样本类型 |
推荐投入量 |
全基因组测序 |
高质量复杂基因组 |
50ng-1μg |
全外显子靶向捕获测序 |
高质量复杂基因组 |
10ng-1μg |
全基因组靶向捕获测序 |
FFPE DNA |
≥50ng |
全基因组测序 |
微生物基因组 |
1ng-1μg |
全基因组测序(PCR-free) |
高质量 DNA |
≥50ng(不分选) ≥200ng(分选) |
推荐使用 TE 或超纯水溶解 DNA 样品,如样品中含有 EDTA,则需磁珠纯化或加入一定体积的 Neutralization Buffer 中和。
【储存条件及有效期】
所有试剂均应保存于-20℃,Ligation Buffer 在低温下会有晶体析出,属正常现象, 应平衡至室温后使用,产品有效期为 12 个月。
【组成成分】
组分 |
24 rxns |
96 rxns |
FEP Buffer |
120 μl |
4×120 μl |
FEP Enzyme Mix |
240 μl |
4×240 μl |
Fast DNA Ligase |
120 μl |
4×120 μl |
Fast Ligation Buffer |
600 μl |
4×600 μl |
2× HIFI Library PCR Master Mix |
600 μl |
4×600 μl |
Primer Mix* |
120 μl |
4×120 μl |
Neutralization Buffer |
120 μl |
4×120 μl |
*FEP Buffer 为片段化、末端修复的反应 buffer,FEP Enzyme Mix 为片段化、末端修复相关酶混合物。
*若有多个样本,则推荐使用#K002 和#K003 接头引物组合,本试剂盒提供一套含 index 的引物。
备注:分选磁珠推荐使用#NC1011 GDSPure DNA Selection Magbeads 或 AMPure XP beads。