T4 DNA Ligase
货号/规格：E1014-A/200 Weiss U; E1014-B/1,000 Weiss U; E1014-C/5,000 Weiss U
浓度：5 Weiss U/µL
产品简介
T4 DNA Ligase催化双链 DNA 或 RNA 中并列的 5'-磷酸和 3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键。该酶可修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交体中的单链缺口，将 DNA 片段与粘性末端或平末端连接结合，但对单链核酸无活性。
T4 DNA 连接酶需要 ATP 作为辅因子。
产品组成
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组分 |
E1014-A |
E1014-B |
E1014-C |
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T4 DNA Ligase (5 Weiss U/µL) |
40 µL |
200 µL |
200 µL × 5 |
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10X T4 DNA Ligase Buffer |
0.5 mL |
1.5 mL |
1.5 mL × 5 |
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50% PEG |
0.3 mL |
1.5 mL |
1.5 mL × 5 |
储存条件
保存于-20°C。
来源
重组 E. coli 菌株，含有从噬菌体 T4 克隆的基因 30。
单位定义
1个 Weiss 单位是指在 37°C 下 20 分钟内催化 1 nmol 的 [32PPi] 转化为可吸附形式所需的酶量。在以下混合物中测定酶活性：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1个 Weiss 单位相当于大约 200 个粘性末端连接单位（CEU）。1个CEU是指在特定条件下（即在16°C下30分钟内），将λ（lambda）DNA的HindIII片段连接达到50%所需的酶量。
适用范围
• 克隆限制性内切酶生成的 DNA 片段
• 克隆 PCR 产物
• 将双链寡核苷酸连接子或接头与 DNA 相连
• 定点突变
• 扩增片段长度多态性 (AFLP)
• 连接酶介导的 RNA 检测
• 双螺旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交体中的缺口修复
• 线性 DNA 的自环化