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T4 DNA Ligase, HC

货号/规格：E1014-D/5,000 Weiss U 

浓度：30 Weiss U/µL

产品简介 

T4 DNA Ligase催化双链 DNA 或 RNA 中并列的 5'-磷酸和 3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键。该酶可修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交体中的单链缺口，将 DNA 片段与粘性末端或平末端连接结合，但对单链核酸无活性。

T4 DNA 连接酶需要 ATP 作为辅因子。

产品组成

储存条件

保存于-20°C。

来源

重组 E. coli 菌株，含有从噬菌体 T4 克隆的基因 30。

单位定义

1个 Weiss 单位是指在 37°C 下 20 分钟内催化 1 nmol 的 [³²PPi] 转化为可吸附形式所需的酶量。在以下混合物中测定酶活性：

66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl ₂、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [³²PPi]。1个 Weiss 单位相当于大约 200 个粘性末端连接单位（CEU）。1个CEU是指在特定条件下（即在16°C下30分钟内），将λ（lambda）DNA的HindIII片段连接达到50%所需的酶量。

适用范围 

• 克隆限制性内切酶生成的 DNA 片段

• 克隆 PCR 产物

• 将双链寡核苷酸连接子或接头与 DNA 相连

• 定点突变

• 扩增片段长度多态性 (AFLP)

• 连接酶介导的 RNA 检测

• 双螺旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交体中的缺口修复

• 线性 DNA 的自环化