DNase I, RNase-Free, HC
货号/规格：E1018-A/1,000 U
浓度：50 U/µL
产品简介
DNase I（无 RNase）是一种可酶切单链和双链 DNA 的核酸内切酶。它水解磷酸二酯键，产生带有 5'-磷酸基团和 3'-OH 基团的单脱氧核糖核苷酸和寡脱氧核糖核苷酸。
该酶的活性严格依赖于 Ca2+，由 Mg2+ 或 Mn2+ 离子活化。
在 Mg2+ 存在时，DNase I 以统计意义上随机的方式独立切割 dsDNA 各链。Mn2+ 存在时，该酶几乎在同一位点切割两条 DNA 链，产生带有平末端或仅一或两个核甘酸的突出端的 DNA 片段。
产品组成
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组分 |
E1018-A |
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DNase I, RNase-Free, HC (50 U/µL) |
20 µL |
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10X DNase I Buffer (Mg2+ Plus) |
1 mL |
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EDTA (50 mM) |
1 mL |
储存条件
保存于-20°C。
来源
重组 E. coli 菌株，含有编码牛 DNase I 的克隆基因。
单位定义
一个单位是指在37°C下1分钟内完全降解 1 µg质粒 DNA所需的酶量。
在以下混合物中测定酶活性：
10 mM Tris-HCl（25°C 时 pH 7.5）、2.5 mM MgCl 2、0.1 mM CaCl 2、1 µg pUC19 DNA。一个 DNase I 单位相当于 0.3 Kunitz 单位。
特点
• 重组酶
• 从非动物宿主纯化而来，内源性 RNase 水平较低
适用范围
• 制备不含 DNA 的 RNA
• 体外转录后去除模板 DNA
• 在进行 RT-PCR 和 RT-qPCR 之前制备无 DNA 的 RNA
• 与 DNA 聚合酶 I 配合，通过缺口平移进行 DNA 标记
• 采用 DNase I（无 RNase）足迹法进行 DNA-蛋白相互作用研究
• 生成随机重叠 DNA 插入片段文库。使用含有 Mn2+ 的反应缓冲液